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LacZ阳性显色为深蓝色,其染色的部位为目的基因敲掉的部位,因此是报告基因的定位。
LacZ基因广泛用于基因表达调控研究中的一种基因。
1969年,美国哈佛大学以Beckwith博士为首的研究小组,套用DNA分子杂交技术首次分离到该基因.LacZ基因编码的β一半乳糖苷酶(简称β-gal)是由4个亚基组成的四聚体,可催化乳糖的水解.
Beta-gal比较稳定,用X-Gal为底物进行染色时,呈蓝色,便于检测和观察.LacZ基因的诸多优点使它成为基因工程实验中的一个常用标记基因,比如常用于转化菌株筛选,β-半乳糖苷酶显色反应选择法,即,蓝白筛选.例如,基因克隆中常用的质粒载体PUC 19及噬菌体载体M13系列均带有LacZ基因.
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原理:当外源DNA插入到载体lacZ标记基因上,导致β-半乳糖苷酶基因失活,因此通过大肠杆菌转化子菌落在添加有X-gal-IPTG培养基中的颜色由蓝色变成白色菌落这一颜色变化直接观察出来。
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本文概览:LacZ阳性显色为深蓝色,其染色的部位为目的基因敲掉的部位,因此是报告基因的定位。LacZ基因广泛用于基因表达调控研究中的一种基因。1969年,美国哈佛大学以Beckwith博士为首的研究小组,套用DNA分子杂交技术首次分离到该基因.LacZ基因编码的β一半乳糖苷酶(简称β-gal)是由4个亚基组成的四聚体,可催化乳糖的水解.Beta-gal比较稳定,用X-Gal为底物进行染色时,呈蓝色,便于检测和观察.LacZ基因的诸多优点使它成为基因工程实验中的一个常用标记基因,比如常用于转化菌株筛选,β-半乳糖苷酶