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引物长度,碱基组成,引物使用缓冲的离子强度有关。
长度为25mer以下的引物,Tm计算公式为:Tm=4℃(G+C)+2℃(A+T)对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为:Tm=81.5+16.6xLog10[Na+]+0.41(%GC)–600/size公式中,Size=引物长度。用Primer5.0,DNAMAN,DNASTAR都可以算,我从来没自己算过。
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本文概览:引物长度,碱基组成,引物使用缓冲的离子强度有关。长度为25mer以下的引物,Tm计算公式为:Tm=4℃(G+C)+2℃(A+T)对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为:Tm=81.5+16.6xLog10[Na+]+0.41(%GC)–600/size公式中,Size=引物长度。用Primer5.0,DNAMAN,DNASTAR都可以算,我从来没自己算过。