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PCR实验方法步骤，麻烦给回复
答精选答案
1、在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2、调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，最后在72℃ 保温7min。
3、结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4、PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
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评论列表（4条）
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希望本篇文章《PCR实验方法步骤》能对你有所帮助！
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本文概览：1、在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。10×PCR buffer5 μl dNTP mix （2mM）4 μl 引物1（10pM）2 μl 引物2（10pM）2 μl Taq酶 （2U/μl）1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。2、调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 6