pcr反应液基本组成

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PCR反应体系由寡核苷酸(引物)、4 种dNTP、Taq DNA聚合酶、靶序列DNA和PCR反应缓冲液体系组成。

设计PCR引物时的一般原则:

(1)引物长度一般15~ 30碱基,过短则特异性低; 过长则会引起引物间的退火而影响有效扩增。

(2) 避免内部二级结构,避免序列内有较长的回文结构,使引物自身不能形成发夹结构。

(3) G/C 和A/T 碱基均匀分布,G/C 含量在45%~ 55% 之间,引物碱基序列尽可能选择碱基随机分布,避免嘌呤、嘧啶的连续排列。

(4) 要避免两个引物间特别是3' 末端DNA 序列互补以及同一引物自身3' 末端的序列互补,使它们不能形成引物二聚体或发卡结构。

(5) 引物3' 端碱基一般应与模板严格配对,并且3' 端为G、C 或T 时引发效率较高。

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评论列表(4条)

  • 袁咏仪靓靓
    袁咏仪靓靓 2026年09月30日

    我是公众科技网的签约作者“袁咏仪靓靓”!

  • 袁咏仪靓靓
    袁咏仪靓靓 2026年09月30日

    希望本篇文章《pcr反应液基本组成》能对你有所帮助!

  • 袁咏仪靓靓
    袁咏仪靓靓 2026年09月30日

    本站[公众科技网]内容主要涵盖:教育咨询,知识百科

  • 袁咏仪靓靓
    袁咏仪靓靓 2026年09月30日

    本文概览:PCR反应体系由寡核苷酸(引物)、4 种dNTP、Taq DNA聚合酶、靶序列DNA和PCR反应缓冲液体系组成。设计PCR引物时的一般原则:(1)引物长度一般15~ 30碱基,过短则特异性低; 过长则会引起引物间的退火而影响有效扩增。(2) 避免内部二级结构,避免序列内有较长的回文结构,使引物自身不能形成发夹结构。(3) G/C 和A/T 碱基均匀分布,G/C 含量在45%~ 55% 之间,引物碱基序列尽可能选择碱基随机分布,避免嘌呤、嘧啶的连续排列。(4) 要避免两个引物间特别是3' 末端DNA 序列互

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