(一)操作前(即为操作前的准备，准备好整个操作过程中所需要用到的东西)

干净的载玻片，细菌标本，生理盐水，胶头吸管，接种环，酒精灯，革兰染液(结晶紫、碘液、95%的乙醇、石碳酸复红液)，计时器。

(二)操作中(即为整个的操作步骤，分别用第一步第二步这种能体现思维逻辑性的词)

第一步：制片

用胶头吸管取一滴生理盐水于干净的载玻片上，再用接种环挑取细菌菌落，将其放到生理盐水中进行研磨直至形成均匀的菌膜，自然干燥后用酒精灯进行固定，固定时在酒精灯外焰高出快速过2～3次，冷却后进行染色;

第二步：染色

1.初染：在细菌涂片上滴加结晶紫染液数滴(覆盖菌膜为宜)，染色时间1min，到时间后用细流水进行冲洗;

2.媒染：在细菌涂片上滴加碘液数滴(以染液覆盖菌膜为宜)，染色时间1min，到时间后用细流水进行冲洗;

3.脱色：在菌膜上滴加95%的乙醇液数滴，并轻摇玻片使其均匀脱色，脱色时间约30s，直至脱下的酒精无色为止，立即用细流水进行冲洗;

4.复染：在菌膜上滴加石碳酸复红染液数滴，时间约30s，到时间后用细流水进行冲洗;

染色后，细菌涂片自然晾干或用吸水纸吸干，再置于显微镜下进行观察，显示紫色的为革兰阳性菌，红色为革兰阴性菌，(此为一张完整的细菌涂片显示的结果，这部分内容在说完具体的染色的步骤后也要简单的提到)。

(三)操作后(能影响到整个试验结果的影响因素以及注意事项都可以答在操作后这一部分里面)

1.在制作细菌涂片时，菌膜不易过后，否则影响染色的结果观察;

2.在用酒精灯的火焰进行固定时，温度不易过高，以不烫手为宜;

3.保证所用试剂位于有效期内，否则试剂失效不能用于染色;

4.染色时，染色时间要固定好，否则过长或过短的染色时间都会都会对最终的染色效果造成一定程度的影响。