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请教各位前辈,为什么我做菌落PCR总也P不出来,有没有大佬在?求高手帮忙看看这个!
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只是蘸取是不行的,要确定体系里有足量的菌,我最近刚做过,发现如果菌少的话也是做不出来的,还有最好在原有预变性温度下增加1分钟,利于细胞裂解,最后电泳检测之前,10000rpm离心五分钟,使菌的裂解碎片完全沉淀,保证电泳是碎片的影响最小,因为有时候电泳菌的碎片会一起随条带前进,感染检测。
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本文概览:只是蘸取是不行的,要确定体系里有足量的菌,我最近刚做过,发现如果菌少的话也是做不出来的,还有最好在原有预变性温度下增加1分钟,利于细胞裂解,最后电泳检测之前,10000rpm离心五分钟,使菌的裂解碎片完全沉淀,保证电泳是碎片的影响最小,因为有时候电泳菌的碎片会一起随条带前进,感染检测。