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反相还是正相,是根据流动相相对于固定相的极性而言的。 流动相极性强于固定相的,称作反相色谱;流动相极性弱于固定相的,称作正相色谱。 反相色谱流动相的极性强,容易带着极性分子走,而留下非极性分子。这主要用于非极性样品的分离。常用的高压液相色谱都是这种,也有人喜欢说反相液相色谱,其实是一个意思,就是显得博学一点。正相色谱固定相极性强,容易把极性分子留下,故主要用于极性样品的分离。如离子色谱。 实际应用好像没有太注意正相还是反相,倒是都很注意柱子能承受什么样极性的物质。反相液相色谱柱不可以用强极性的纯水,都是要加入至少5%的有机溶剂来弱化水的极性。 正相的离子色谱柱则坚决不可以进入有机物质。但是气相色谱实际也是一种正相色谱,却往往要求不可以有水进入。
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1、固定相不同:正相硅胶具有极性基的表面,而反相硅胶是经过改性,表面键合烷基链(例如 C-18),极性更小,因此对极性化合物有较小的保留。
2、适用的样品类型不同:由于反相条件下,修饰了硅胶表面的羟基,使其极性降低,使得其适用性变得更加宽广(相对比反相而言),各类极性的大小分子,天然产物,都可以在反相体系中得到有效分离。
3、流动相不同:正相色谱,因为硅胶表面的硅羟基极性大,极性大的水溶性化合物很难被洗脱下来,只有使用更强极性的溶剂才能成功。在反相色谱中,因为极性化合物和固定相的吸附性较小,因此用较小极性的溶剂,就可以实现比较理想的洗脱效果。
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本文概览:反相还是正相,是根据流动相相对于固定相的极性而言的。 流动相极性强于固定相的,称作反相色谱;流动相极性弱于固定相的,称作正相色谱。 反相色谱流动相的极性强,容易带着极性分子走,而留下非极性分子。这主要用于非极性样品的分离。常用的高压液相色谱都是这种,也有人喜欢说反相液相色谱,其实是一个意思,就是显得博学一点。正相色谱固定相极性强,容易把极性分子留下,故主要用于极性样品的分离。如离子色谱。 实际应用好像没有太注意正相还是反相,倒是都很注意柱子能承受什么样极性的物质。反相液相色谱柱不可以用强极性的纯水,都是要