问问题描述
迁移实验的四个步骤，有没有人理理我？急需求助！
答精选答案
迁移实验步骤
迁移实验
目的：检测细胞的迁移能力或药物对细胞迁移能力的影响。
材料：HepG2细胞、BD公司 insert、BD公司 24孔板
步骤：
1. 将饥饿24小时的细胞从孵箱取出，酶解好，弃酶，加入无血清培养基，吹打混匀，离心800 x 3min.
2. 弃上清，细胞沉淀加入无血清培养基吹打混匀，计数，稀释浓度为2 x 105个/ml.
3. 取出insert放入24孔板中。先加下室培养基（含血清1%）700微升，insert中加入200微升细胞悬液。
4. 将insert放置到24孔板的相应位置，防止insert底部有气泡，否则将影响实验结果。
5. 37℃孵箱 4--6小时。
6. 取出24孔板，弃去上下室培养基。下室加入700微升从-20保存的甲醛，4度放置1小时。
7. 弃去甲醛，PBS洗一遍，下室加入苏木精700微升。染色20-30min.
8. 回收苏木精。Insert 用PBS洗3遍，每次都用棉棒擦拭insert里边，将没有迁移的细胞擦去。
9. 下室加入PBS700uL，将Insert放好，明视场照相（200倍）。每组每个Insert随意拍照6个视野，细胞计数取平均值。
10. 细胞计数用imageJ软件。Open--分析--cell count。
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评论列表（4条）
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希望本篇文章《迁移实验的四个步骤》能对你有所帮助！
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本文概览：迁移实验步骤迁移实验目的：检测细胞的迁移能力或药物对细胞迁移能力的影响。材料：HepG2细胞、BD公司 insert、BD公司 24孔板步骤：1. 将饥饿24小时的细胞从孵箱取出，酶解好，弃酶，加入无血清培养基，吹打混匀，离心800 x 3min.2. 弃上清，细胞沉淀加入无血清培养基吹打混匀，计数，稀释浓度为2 x 105个/ml.3. 取出insert放入24孔板中。先加下室培养基（含血清1%）700微升，insert中加入200微升细胞悬液。4. 将insert放置到24孔板的相应位置，防止inse